Validación de un método Hsb para generar una atmósfera de Dióxido de Carbono (CO2) en cepas aisladas de Campylobacter en el Hospital Nacional Docente Madre Niño San Bartolomé

Abstract

Objetivo: Validar un método alternativo (HSB), basado en la mezcla entre bicarbonato de sodio y ácido acético al 5%, para generar una atmósfera rica en dióxido de carbono (CO₂) que favorezca el crecimiento de Campylobacter en condiciones controladas realizadas en Hospital Nacional Docente Madre Niño San Bartolomé. Metodología: Se realizó este estudio con un enfoque cuantitativo, con diseño no experimental, transversal y descriptivo. Se trabajó con tres cepas obtenidas a partir de aislamientos clínicos de Campylobacter jejuni, evaluando el método HSB mediante cinco criterios de validación: robustez, precisión, especificidad, confiabilidad y límite de detección. Se aplicaron diluciones de 10⁻¹ a 10⁻⁸, en incubaciones a 32 °C, 37 °C y 42 °C, durante 24, 48 y 72 horas. Cada combinación se repitió por tres veces. Resultados principales: Como resultados se observó que a 42 °C se logró crecimiento hasta en las diluciones más altas (10⁻⁸). A 37 °C, el crecimiento se observó hasta 10⁻³ y en 32 °C hasta 10⁻². Se evidenció cierta variabilidad entre cepas, aunque con una tendencia repetible, apoyando la precisión del método. Se evidencio entre 3 y 5 contaminaciones, lo cual fue evaluado en la dimensión de especificidad. El límite de detección varió según las condiciones, reflejando sensibilidad ante diferentes concentraciones microbianas. Conclusión: El método HSB se muestra como una alternativa efectiva, económica y practica para generar atmósferas de dióxido de carbono (CO₂), siendo un método útil para el cultivo de Campylobacter jejuni en entornos donde no se dispone de sobres Gaspak de CO2.

Objective: To validate an alternative method (HSB), based on the reaction between sodium bicarbonate and 5% acetic acid, for generating a carbon dioxide (CO₂)-rich atmosphere that supports the growth of Campylobacter under controlled conditions at the National Teaching Hospital Madre Niño San Bartolomé. Methodology: This research followed a quantitative approach with a non-experimental, cross sectional, and descriptive design. Three strains of Campylobacter jejuni, obtained from clinical isolates, were analyzed to assess the HSB method through five validation criteria: robustness, precision, specificity, reliability, and detection limit. Serial dilutions from 10⁻¹ to 10⁻⁸ were incubated at 32 °C, 37 °C, and 42 °C for 24, 48, and 72 hours, with each condition repeated three times. Main results: At 42 °C, growth was observed even at the highest dilutions (10⁻⁸). At 37 °C, growth was sustained up to 10⁻³, and at 32 °C up to 10⁻². Although some variability between strains was recorded, a consistent trend supported the precision of the method. Between 3 and 5 contaminations were detected, evaluated under the specificity dimension. The detection limit varied across temperatures, demonstrating sensitivity to different bacterial concentrations. Conclusion: The HSB method proved to be an effective, practical, and low-cost alternative for generating CO₂-enriched atmospheres, offering a useful approach for cultivating Campylobacter jejuni in laboratories without access to commercial CO₂ systems such as GasPak sachets.