Validación del ensayo microbiológico de una solución de Amonio Cuaternario al 0,25% para limpieza de superficies, basado en la Farmacopea Americana vigente. Lima 2023

Abstract

This study aimed to validate the analytical technique of microbial count by dilution–neutralization of 0.25% quaternary ammonium, applying the pour plate method for test microorganism recovery. Statistical analyses were performed using SPSS and Minitab software. Results showed microbial counts below 100 CFU for Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Bacillus subtilis ATCC 6633, Candida albicans ATCC 10231, and Aspergillus brasiliensis ATCC 16404. The suitability test successfully recovered all test microorganisms at the 10⁻² dilution, with growth and identification of specific microorganisms. Validation of the neutralization method demonstrated effective performance of the neutralizer at the 10⁻² dilution, along with the absence of toxicity. Accuracy of recovery percentages was within the 90% confidence interval, while assay precision remained <15% coefficient of variation. The neutralizers proved specific in inhibiting the antimicrobial properties of quaternary ammonium. The detection limit showed recovery of P. aeruginosa > 11 CFU and S. aureus > 17 CFU, while robustness analysis revealed no significant variability in microbial counts across different incubation times. In conclusion, the dilution–neutralization method using 0.5% soybean lecithin and 4% polysorbate 80 allowed effective recovery of test microorganisms at the 10⁻² dilution.

La presente investigación tuvo como Objetivo: Validar la Técnica analítica de Recuento Microbiano, mediante la dilución - neutralización del Amonio Cuaternario al 0,25 %, utilizando como Método de vertido en placa para la recuperación de microorganismos de prueba, para el desarrollo de los parámetros estadísticos se utilizó los Softwares SPSS y Minitab. Los Resultados obtuvieron recuentos menores a 100 UFC para las Cepas Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 Staphylococcus aureus ATCC 6538, Bacillus Subtilis ATCC 6633, Candida albicans ATCC 10231 y Aspergillus brasiliensis ATCC 16404, la prueba de Aptitud recuperó todos los microorganismos de prueba en la dilución 10-2 y presentó crecimiento e identificación de microorganismos específicos. La Validación del método de neutralización evidenció eficacia adecuada del neutralizante en la dilución 10-2 y a su vez se demuestra la ausencia de toxicidad del neutralizante. La Exactitud de los porcentajes de recuperación se encuentran dentro del intervalo de confianza del 90%, la Precisión del ensayo se encuentra < 15 % del coeficiente de variación, a su vez se demuestra que los neutralizantes utilizados son específicos para inhibir las propiedades antimicrobianas del Amonio Cuaternario. El Límite de detección recuperó Pseudomonas aeruginosa > 11 UFC y Staphylococcus aureus > 17 UFC la robustez demuestra que no existe variabilidad significativa en los recuentos, en distintos tiempos de incubación Concluyendo que el método de dilución – Neutralización con Lecitina de soya 0,5% y Polisorbato 80 4%, permitió la recuperación de los microorganismos de prueba en la dilución 10-2.