Desarrollo y validación de un método analítico por Cromatografía Líquida de Alta Resolución para 4-Hexilresorcinol 2,4 mg en pastillas para chupar, Lima 2025

Abstract

Esta investigación se orientó a desarrollar y validar un método analítico por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) para la determinación de 4Hexilresorcinol 2,4 mg en pastillas para chupar. El desarrollo del método incluyó optimización del sistema cromatográfico mediante un diseño experimental BoxBehnken. En el parámetro de especificidad fueron sometidos a estrés térmico, oxidativo, ácido, alcalino y luz blanca tanto el estándar como el placebo y la muestra. Se observó un degradado en estrés oxidativo y cinco degradados en estrés alcalino, solo en el estándar y la muestra. La pureza de pico del estándar fue 999,97, cumpliendo el criterio (> 990). La linealidad del método y del sistema mostraron coeficientes de determinación y correlación de 0,9999 y 0,9998, respectivamente y con RSD% del factor de respuesta de 0,648% y 0,647%, respectivamente. La aptitud del sistema presentó un RSD% de 0,103% en seis inyecciones, un tailing factor de 1,09 y platos teóricos fue 3729,21. La precisión del método presentó un RSD% de 0,025% (< 2%). La exactitud, evaluada mediante T-Student, confirmó recuperaciones aceptables (t-exp < t-tabla), t-exp de 1,478, menor al t-tabla (2,306). Asimismo, el método analítico mostró adecuada precisión intermedia, ya que se obtuvo resultados semejantes con el mismo equipo, con dos analistas y en 3 días distintos. En conclusión, el método analítico cromatográfico desarrollado para 4-hexilresorcinol 2,4 mg en pastillas para chupar, cumpliendo con los parámetros de desempeño establecidos por la USP para la validación.

This research aimed to develop and validate an analytical method using high-performance liquid chromatography (HPLC) for determination of 4-Hexylresorcinol 2,4 mg in lozenges. The method development included optimization of the chromatographic system through a Box-Behnken experimental design. For the specificity parameter, the standard, placebo, and sample were subjected to stress conditions: thermal, oxidative, acidic, alkaline, and exposure to white light. Only in standard and sample were observed one degradation product under oxidative stress and five degradation products under alkaline stress. The peak purity of the standard was 999,97, over the acceptance criterion (> 990). Regarding linearity, both the method and the system demonstrated coefficients of determination and correlation of 0,9999 and 0,9998, respectively, with RSD% values for response factor of 0,648% and 0,647%, respectively. System suitability showed an RSD% of 0,103% across six injections, a tailing factor of 1,09, and theoretical plates of 3729,21. Method precision yielded an RSD% of 0,025% (< 2%). Accuracy, evaluated using the Student’s t-test, confirmed acceptable recoveries (t-exp < t-table), with a t-exp of 1,478, lower than the t-table value (2,306). Furthermore, the analytical method demonstrated adequate intermediate precision, as consistent results were obtained using the same equipment, with two analysts, and across three different days. In conclusion, the analytical method developed by high-performance liquid chromatography for 4-Hexylresorcinol 2,4 mg in lozenges complies with the performance parameters established by the USP for validation.