Concordancia entre el método en microplacas y cromatografía de alta performace para la medición de Zinc protoporfirina en sangre humana, Lima, Noviembre 2025

Abstract

El presente estudio tiene por finalidad determinar la concordancia entre el método en microplacas y la cromatografía líquida de alta performance (HPLC) para la determinación de zinc protoporfirina (ZPP) en sangre humana. La ZPP es un biomarcador de efecto útil para el diagnóstico de la intoxicación por plomo, problemática que se da en poblaciones expuestas a actividades mineras, como es el caso de Perú. El método gold estándar HPLC requiere de equipamiento costoso, es por ello que, en este estudio se propone la validación de un método alternativo, más sencillo y más accesible de realizar usando microplacas, con extracción alcohólica y lectura fluorométrica. Se analizarán 80 muestras de sangre venosa anticoagulada con EDTA, protegidas de la luz, recolectadas en un hospital de Lima durante el mes de noviembre de 2025. El presente estudio sigue un diseño observacional, transversal y prospectivo, con un enfoque cuantitativo. Se utilizarán gráficos de Bland-Altman y el Coeficiente de Correlación Intraclase (CCI) como pruebas para determinar la concordancia entre ambos métodos; se espera que el método en microplacas sea clínicamente intercambiable con el HPLC, permitiendo así aumentar el acceso a pruebas de biomarcadores, mejorando así el seguimiento de las personas expuestas a contaminación por plomo.

The purpose of this study is to determine the agreement between the microplate method and high-performance liquid chromatography (HPLC) for the determination of zinc protoporphyrin (ZPP) in human blood. ZPP is a useful biomarker for the diagnosis of lead poisoning, a problem that occurs in populations exposed to mining activities, as is the case in Peru. The gold standard HPLC method requires expensive equipment; therefore, this study proposes the validation of an alternative, simpler, and more accessible method using microplates with alcoholic extraction and fluorometric reading. Eighty samples of venous blood anticoagulated with EDTA, protected from light, will be analyzed. These samples were collected at a hospital in Lima during November 2025. This study follows an observational, cross-sectional, and prospective design with a quantitative approach. Bland-Altman plots and the Intraclass Correlation Coefficient (ICC) will be used to determine the agreement between the two methods. It is expected that the microplate method will be clinically interchangeable with HPLC, thus increasing access to biomarker testing and improving the monitoring of individuals exposed to lead contamination.