Comparison of two methods for the detection of residual antimicrobial activity in urine cultures processed at the National Teaching Hospital Madre Niño San Bartolomé

Abstract

Objective: To determine which method, paper diffusion or direct inoculation, detects residual antimicrobial activity more frequently in urine cultures processed at the National Mother-Child Teaching Hospital in San Bartolomé. Materials and Methods: A descriptive, cross-sectional study was conducted from January to March 2014, processing 2024 urine samples from outpatients and hospitalized patients. For both methods to detect residual antimicrobial activity, the samples were inoculated on Muller Hinton agar plates with the Bacillus subtilis ATCC 6633 sensor strain at a 0.5 McFarland scale. In the paper diffusion method, 10 µL of urine was applied on a disk, while in the direct inoculation method, 1 µL of urine was directly inoculated on the agar plate with a sterile loop. Both plates were incubated at 37°C for 24 hours. The presence of an inhibition zone around the disk or direct inoculation point was considered as the presence of residual antimicrobial activity. The absence of an inhibition zone was considered as the absence of residual antimicrobial activity. Results: Residual antimicrobial activity was detected in 9.7% (196/2024) of the urine samples using the paper diffusion method, compared to 6.4% (129/2024) using the direct inoculation method. Moreover, 67 (3.3%) urine samples showed residual antimicrobial activity detected only by the paper diffusion method. In total, 1828 (90.3%) samples showed no residual antimicrobial activity with either method, and 129 (6.4%) showed residual antimicrobial activity. Conclusions: The paper diffusion method has a higher detection rate for residual antimicrobial activity in urine samples processed at the National Mother-Child Teaching Hospital in San Bartolomé.

Objetivo: Determinar cuál de los dos métodos, difusión en papel impregnado o inoculación directa, detecta con mayor frecuencia la actividad antimicrobiana residual en cultivos de orina procesados en el Hospital Nacional Docente Madre Niño San Bartolomé.

Materiales y métodos: Se realizó un estudio descriptivo de corte transversal durante el periodo enero a marzo del 2014, en la cual se procesaron 2024 muestras de orina de pacientes ambulatorios y hospitalizados. En ambos métodos para la detección de actividad antimicrobiana residual se inocularon la en placas de agar Muller Hinton con la cepa sensor Bacillus subtilis ATCC 6633 a la escala de 0.5 Mc. Farland. En el método difusión en papel impregnado se empleó 10 uL de orina sobre un disco y en el método inoculación directa se utilizó 1 uL de orina que fue inoculado directamente con el asa de siembra sobre la placa de agar de Muller Hinton, ambas placas se incubaron a 37 °C por 24 horas. La observación de un halo inhibición alrededor del disco o de la punción directa se consideró como presencia de actividad antimicrobiana residual en la muestra de orina, la no presencia del halo de inhibición se consideró como la ausencia de actividad antimicrobiana residual en la muestra de orina.

Resultados: Se encontró una mayor detección de actividad antimicrobiana residual en muestras de orina con el método difusión en papel impregnado con un 9.7% (196/2024) comparado con el método de inoculación directa que solo detectó el 6.4% (129/2024) del total de muestras analizadas. Además debe destacarse que en 67 (3.3%) muestras de orina fueron detectados actividad antimicrobiana residual solamente por el método difusión en papel impregnado. Finalmente, se encontró que ambos métodos no detectaron actividad antimicrobiana residual en 1828 (90.3%) muestras de orina, y si detectaron actividad antimicrobiana residual en 129 (6.4%) muestras de orina.

Conclusiones: El método difusión en papel impregnado tiene un nivel de detección mayor para la detección de actividad antimicrobiana residual, en muestras de orina, recepcionados para urocultivos procesados en el laboratorio de microbiología del Hospital Nacional Docente Madre Niño San Bartolomé